三、蛋白质分子量的测定 蛋白质分子量测定的方法很多,目前常用的方法有以下几种。 3.1 凝胶过滤法 凝胶过滤法测定蛋白质分子量的原理如“分离纯化方法”中所 述。一定型号的凝胶颗粒上具有一定大小的孔隙,只允许较小的分子进入胶粒,而大于孔隙的分子则不能进入胶粒而被排阻在胶粒外面。用洗脱液洗脱时,被排阻的分子量大的蛋白质先被洗脱下来,随后能够进入颗粒的蛋白质也按分子量大小而先后被洗脱下来,分子量越小的越后被洗脱下来。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围,在此范围内,分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此,用几种已知分子量的蛋白质为标准进行层析分析,北京化学分析蛋白纯化系统厂家报价,以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图,绘制出标准洗脱曲线,北京化学分析蛋白纯化系统厂家报价,北京化学分析蛋白纯化系统厂家报价。未知蛋白质在同样的条件下进行层析分析,根据其所用的洗脱体积,从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分子量来。
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