[VIP第1年] 指数:3
用于和DNA或RNA结构类似的寡核苷酸合成的自动化仪器，即是DNA合成仪。通常用于固相合成法，每次在长的寡核苷酸链上接入一个核苷酸。加入每一个核苷酸均通过相同的化学反应和相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。仪器不同，所用化学反应和操作细节也会随之发生变化。DNA合成的磷酸酰胺法得到了非常***的应用。特点与性能根据产物承载容器来分，能够分为两类，分别为无需一次性合成仪两类与一次性合成柱。POLYPLEX,ABI，oligomaker，mermade，ASM等所有品牌合成仪的合成产物的承载容器均使用一次性合成柱（不包括德国polygen系列合成仪）。根据试剂碱基添加方式分类，电磁阀气动驱动，蠕动泵驱动分别为DNA合成仪的两种类型。1、采用蠕动泵驱动型碱基试剂溶液采用精密蠕动泵来进行驱动不同碱基试剂溶液，选择添加通过蠕动泵驱动，相互滑动滑块，广东正规RNA合成仪服务商。德国POLYGEN系列DNA合成仪为主要的品牌。2、电磁阀气动驱动型碱基试剂溶液采用高于大气压的惰性气体（氩气，氮气或氦气）来进行驱动，试剂或碱基溶液的添加通过开合微量电磁阀。mermade系列DNA合成仪、GE系列合成仪，广东正规RNA合成仪服务商、biolytic系列合成仪，广东正规RNA合成仪服务商、oligomaker系列合成仪以及ABI系列合成仪均为DNA合成仪的主要品牌。根据用途不同，实验室型。
手工测序以及自动测序均属于DNA序列测定，手工测序可分为maxam-gilbert化学降解法与sanger双脱氧链终止法，事实上，目前dna序列分析的主流是自动测序。373型、377型、310型、3700和3100型等多种型号DNA测序仪均已经被美国peabi公司生产出来了，在这几款DNA测序仪中，临床检测实验室使用**多的一种型号要属310型。发展历史70年代末，化学法和双脱氧手动测序，同位素标记法分别由WalterGilbert与FrederickSanger发明出来。80年代中期，应用双脱氧终止法原理，自动测序仪出现了，同位素被荧光取代了，计算机图象识别。90年代中期，测序仪得到了重大改进，凝胶电泳由集束化的毛细管电泳取代了。2001年，人类基因组框架图被完成。注意事项1．bigdye荧光标记终止底物循环测序试剂盒为本实验使用的测序试剂盒，通常650bp左右为可测dna长度，(±)%为本仪器dna测序精确度，如果仪器所需测定的长度高于650bp，不能辨读的碱基n<2%，那么就需要设计另外的引物。能够设计反向引物对同一模板进行测序，相互印证以便确保更为准确地测序。能够人工核对n碱基，有时能够将其辨读出来，为了使测序的精确度提高，按照星号提示位置，能够对该处彩色图谱进行人工分析，进一步核对该处碱基。
使大量人力、物力、财力得以节省，以便将来能够对酶的结构进行改变，使其在工业上更有价值。对蛋白质和多肽的结构进行改变，使新***得以制备，并且对有关人类疾病和遗传调控的新领域进行了开拓。有效方法分离和制造目的基因的一些有效方法在基因工程学工作者艰苦细致的探索研究下已经掌握了。通常而言，目前有反向转录法、基因组扩增法、人工合成三种获取目的基因的方法。1、人工合成全长引物根据某一蛋白质的基因序列或氨基酸序列，进行设计，模版DNA通过OVERLAP方法来形成，再利用PCR扩增的方法使双链DNA得到，之后在克隆载体或者表达载体中转化克隆PCR产物。目前为止，速度zui快，准确率zui高的方法是化学合成全基因，同时能够以密码子在不同宿主细胞的不同的实验需求和偏爱性，对基因序列进行设计，使表达水平得以提高。2、反向转录法对于分子量较大而又不知其序列的基因，反向转录法比较适用，其的模板为目的基因的mRNA，对上下游引物进行设计，对反转录酶合成碱基互补的DNA片段进行借助，然后再在DNA聚合酶的作用下将双链cDNA合成，也就是目的基因的双链DNA。3、基因组扩增法基因组能够通过基因组抽提试剂盒直接从细胞、植物、血液、动物**中分离出来。
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